Фураж: Tilsetningsstoffer etter reglene
Kvinnelige V>
Hva om moren foder babyen med brystet, men har ikke nok melk? Å mate med en blanding - kvinner tøver ikke å svare. Bare gjør det riktig - leger vil legge til.
Bestem om du trenger - допълнителен барнет сред меки и оскъдни. Виждам ден, fortsetter legene primært fra barnets velvære: friske barn får «klassiske» tilpassede blandinger, og noen ganger med alergi, oppkast, forstoppelse, terapeutiske produkter foreskrives.
Hvor mye à gi barnet en blanding, avhenger av omfanget av mangel på morsmelk. Legene anbefaler - starte fra det faktum at det daglige volumet av babyens mat skal svare til 1/6 - 1/7 av vekten; hvis ved den beregningen han ikke har nok 200 g, så i løpet av dagen må du gi ham 200 g av blandingen. Med et lite underskudd, når krummen ikke spiser opp med morsmelk, starter «måltidet» med amming og deretter gi en flaske - litt vil drikke så mye som han trenger.
Hvis mengden av blandingen er sammenlignbar med volumet av morsmelk, kan man være helt кърма, og andre - «колба».
Hvis du bary begynner е допълнителен barnet ditt med en blanding, gi det litt og gradvis. За да получите най-доброто от това, че сте голи мюзикъли и екстрем тилфел - ellers forsøk på å plukke opp et produkt er bedre (billigere, mer nyttig
) kan påvirke barnets velvære. Det er derfor, når man velger en blanding, er det også nødvendig å fortsette fra det faktum at det var tilgjengelig - for eksempel ved salg til salgs - og du måtte da ikke lete etter en annen.
Det eneste tilfellet når erstatningen av blandingen er berettiget, er overgangen fra medisinblandingen til den vanlige. I dette tilfellet, på den første dagen, blir barnet gitt 1 scoop av en ny blanding i hver fôring (du kan blande den med den gamle); 2. даг - 2 ss og så videre. I tilfelle problemer i 2-4 dager, ikke øk mengden av den nye blandingen, og fortsett deretter utskiftningen.
Mammas melk, blinging og nye produkter - hvordan å organisere en meny i dette tilfellet?
Grønnsaker и fruktpuréer, frokostblandinger, surmjölkprodukter begynner å vises på barnemenyen etter 4 måneder. Hvis krummen får en blanding i tillegg to morsmelk, erstatter det gradvis «nye gjenstander» det, мъже изменят leger anbefaler å holde det så lenge som mulig.
Gi babyen så mye morsmelk som du har, og på et tidspunkt når du er mer komfortabel. Grønnsaker, fruktpuréer и frokostblandinger tilbyr dagen før blandingen og сок - и интервал на мелома метинген. За eksempel, hvis maten din 6 måneder gamle baby spiser 100 g вегетабилно пюре, vil resten i samme fôring være en blanding - slik at hele mengden spist var ca 200 g.
Влиянието на пробиотичните фуражни добавки върху морфофункционалното състояние на свинете в дванадесетопръстника Текст научной статии по специалност «Биология»
Анотация научна статистика по биология, автор научна работа - Коцюмбас Г.И., Лемишевский В.М., Костинюк А.К.
Статията е посветена на изследването на ефекта на> плазмените клетки в ламинираната пропиоза на лигавицата на дванадесетопръстника, което подпомага храносмилателния процес и увеличава областта на усвояване на хранителни вещества в червата. Броят на плазмените клетки се увеличава в ламината на лигавицата и свидетелства за имуномодулиращ ефект на фуражните добавки. Ултраструктурно изменение на микроворси и промени в ядрата на дуоденални ентероцити на прасенца от първа група показва по-изразена функционална активност на ентероцитите и по този начин повишава активността на париеталното храносмилане в червата. В заключение, задачата по дефиниция на ефективната доза пробиотик във фураж за прасе може да се състои> пробиотиците могат да бъдат включени като алтернатива на антибиотиците и да увеличат наддаването на тегло на животните, а също и да повишат нивото на имунна резистентност на организма.
Подобни теми научни работници по биология, автор научни работи - Kotsyumbas GI, Lemishevskyi VM, Kostyniuk AK,
Текст научной работы на тема «Влиянието на пробиотичните фуражни добавки върху морфофункционалното състояние на прасетата на дванадесетопръстника»
HayKOBMM BiCHMK ^ tBiBCtKoro Ha ^ OHa ^ tHoro yHiBepcMTeTy
BeTepMHapHoi Megw ^ HM Ta öioTexHO ^ oriw iMeHi C.3. I ^ М ^ Koro
Научен пратеник на Националния университет по ветеринарна медицина и биотехнологии в Лвов
ISSN 2518-7554 печат ISSN 2518-1327 онлайн
doi: 10.15421 / nvlvet8705 //nvlvet.com.ua/
Влиянието на пробиотичните фуражни добавки върху морфофункционалното състояние на свинете от дванадесетопръстника
Г. И. Коцюмбас, В. М. Лемишевский, А. К. Костинюк
Stepan Gzhytskyi Национален университет по ветеринарна медицина и биотехнологии Лвов, Украйна
Постъпили на 29.01.2018 г. Постъпили в преработена форма
06.03.2018 Приет 12.03.2018
Степан Гжицки Национален
Университет по ветеринарна медицина и биотехнологии, ул. Пекарска 50, Лвов 79010, Украйна.
Тел .: + 38-032-239-26-91 E-mail: [защитен имейл]
Kotsyumbas, GI, Lemishevskyi, VM, & Kostyniuk, AK (2018). Влиянието на пробиотичните фуражни добавки върху морфофункционалното състояние на свинете от дванадесетопръстника. Научен пратеник на Националния университет по ветеринарна медицина и биотехнологии в Лвов. 20 (87), 27-31. doi: 10.15421 / nvlvet8705
Статията е посветена на изследването на ефекта на клас микроорганизми и вещества от микробен и друг произход, които се използват при хранене на прасета за постигане на максимален растеж на животинската маса, както и за терапевтични цели. Проучване на ефекта на биологично активни добавки върху състоянието на храносмилателната система на прасето. Статията разглежда рационалното хранене, което повишава производителността и репродуктивния капацитет на животните, а също така предотвратява появата на дълбоки нарушения на всички метаболитни процеси, което води до намаляване на устойчивостта към производителност, клинично изразено заболяване на възрастни животни и млади животни. Авторите обръщат внимание на морфометричните параметри, ултраструктурата и съдържанието на нуклеинови киселини в стената на дванадесетопръстника на свине чрез фуражно хранене с добавка на пробиотична фуражна добавка «Probion-forte» в доза 1 g / kg фураж. Изследванията са проведени на 28 дневни прасета, порода «Голямо бяло». Формираха се две групи прасенца на 30 глави; прасенцата бяха хранени със стандартни смесени фуражи; прасенца от първата група бяха получени стандартен смесен фураж с добавка на пробиотична фуражна добавка «Probion-forte» в доза 1 g / kg фураж за 42 дни. След клането на прасенца са избрани парчета дванадесетопръстник за хистологични, хистохимични и ултраструктурни изследвания. Статистическата значимост на разликите се определя от t теста на Стюдент, като се допуска 5% грешка в оценката. Показано е, че подхранването с фураж в рамките на 42 дни от добавянето на пробиотична фуражна добавка «Probion-forte» в доза от 1 g / kg, увеличава се височината на ворсите, дълбочината на криптите и редица плазмени клетки в ламинираната пропиоза на лигавицата на дванадесетопръстника, което подпомага храносмилателния процес и увеличава областта на усвояване на хранителни вещества в червата. Броят на плазмените клетки се увеличава в ламината на лигавицата и свидетелства за имуномодулиращ ефект на фуражните добавки. Ултраструктурно изменение на микроворси и промени в ядрата на дуоденални ентероцити на прасенца от първа група показва по-изразена функционална активност на ентероцитите и по този начин повишава активността на париеталното храносмилане в червата. В заключение, задачата по дефиниция на ефективната доза пробиотик във фураж за прасе може да се счита за изпълнена и можем да заявим, че пробиотиците могат да бъдат включени като алтернатива на антибиотиците и да увеличат наддаването на тегло на животните, а също и да увеличат нивото на имунната резистентност на организма.
Ключови думи: пробиотици, чревна дванадесетопръстника, вили, ентероцити, плазмени клетки.
Нормалната функция на стомашно-чревния тракт на животните, въпреки непрекъснатия прием на патогенни бактерии, може да се поддържа само ако естественият баланс на стомашно-чревната микрофлора (Lemishevskyi, 2011; Lemishevskyi, 2017). Влиянието на някои външни и вътрешни фактори (лошо качество на храната, несанитарни стандарти, подлост и неподходяща употреба на антибиотици) води до нарушаване на динамичното равновесие на микробните асоциации в здрав организъм, т.е. развитие на дисбиоза (Lobsyn et al., 2003).
В условията на сектора на индустриалната икономика често при животни се наблюдава нарушаване на нормалното съдържание на микро
флора, която е придружена от рязко намаляване на симбиотичните микроорганизми (Sculze and Bathke, 1977). В допълнение, различни заболявания на стомашно-чревния тракт, характеризиращи се основно с дисбактериоза на чревната микрофлора, водеща до нарушаване на храносмилането, метаболизма, намаляване на резистентността и производителността на животните.
Пробиотичните лекарства могат да оптимизират условията на околната среда в червата за развитието на собствената им микрофлора на гостоприемника (Лукашчук, 2017), като броят им нараства в Украин. Все още обаче е необходимо да се изясни ефективността на пробиотиците в отглеждането на свине и основните механизми на тяхното действие.
материали и методи
Всички експерименти с животни са проведени в съответствие с принципите, изложени в Закон на Украйна № 3447-IV, параграф 26 «За защитата на животните от жестокост». Експериментът е проведен в образователен и изследователски и производствен център «Komarnivskyj» Городок област, Лвовска област, Украйна на прасенца на «Голямо бяло», на възраст 28 дни. Съгласно принципа на аналозите са образувани две групи за търсене на прасенца на 30 глави във всяка. Прасенцата от първата група са били хранени със смесен фураж в съответствие с правилата, препоръчани за порода «Голям бял», като се вземат предвид възрастовите категории.
На 42-ия ден от експеримента на 5 глави от всяка група бяха изтеглени от експеримента, проведено е патологично и анатомично рязане с подбора на материал. Пробите от тъканите се поддържат в 10% неутрален буферен формалин, течност Karnua, с допълнително изливане в парафин съгласно конвенционалните методи. Секциите бяха направени на микротом MS-2 («фабрика в Харков« Tochmedpribor », Украйна) с дебелина 7 ± 1 ^ m. Препаратите бяха оцветени с хематоксилин и еозин (H&E), метилово зелено (CI 42590) и пиронин Y (CI 45005) от Brachet (Pyronin / MG Brachet) (Sigma-Aldrich, Германия) (Mulisch and Welsch, 2010). За хистологичен анализ тъканните участъци са заснети с помощта на цветна цифрова камера с висока разделителна способност, монтирана на микроскоп Olympus CX41 (Olympus, Япония).
За да се изследва ултраструктурата на лигавицата на дванадесетопръстника на прасета, дванадесетопръстника се фиксира в 1, 5% натрий
Фигура 1. Лигавица на дванадесетопръстника на прасенца от контролната група. H&E, x100
В първата група прасенца, които са били хранени с пробиотик «Probion-forte» заедно с фураж в доза 1, 0 g / kg, вилите под формата на листа са добре структурирани (фиг. 3) и малко по-високи в сравнение с контролна група прасенца. Призматични епителни клетки с подчертана ацидофилна граница на апикалната повърхност (фиг. 4).
Чрез морфометричното изследване височината на въшката на лигавицата на дванадесетопръстника на прасета от контролната група е била 315.13 ^ m, а при прасета от първа група височината на villus е
на глутаминов алдехид в 0, 2 моларен какоди-личен буфер (pH 7, 2) - 2 часа. Пробите се промиват на две порции буфер и се фиксират в 5% разтвор на осмиев оксид. След измиване, дехидратация в повишаващи се концентрации на етанол, контрастирани проби от уранилов ацетат и поставени в епоксидна смола - Epon 812 (Sigma-Aldrich, Германия). Микро укротяване се провежда на ултра микротом, контрастиран уранил с ацетат и оловен цитрат (SPI-Chem, САЩ). Пробите бяха прегледани и заснети в електронно-предавателната микроскопия Tesla - BS-500 (TES-LA, Чехия). Провеждане на морфометрия и спазване на препоръка на Г. Г. Автандилова (Автандилов, 2002), извършване на поне 50 измервания на всеки параметър при една и съща микропрепарат.
Статистически анализ надеждността на разликата между статистическите характеристики на двата набора от експериментални данни, тя се определя от съотношението на Стьюдент и счита промените за достоверни в степента на значимост на P i Опитайте сервис подбора литератури.
Забележка: * - P i не можете да намерите това, което ви трябва? Опитайте сервис подбора литератури.
cyberleninka.ru
Хранителна добавка по правилата
Развитие на фундаментални изследвания на симбиотични взаимодействия и негови микробиоти получили ново направление във връзките с появата на представени за съществуването на бактерии в вид биопленок, което определи точно уточнение на роли пробиотици и особености - кормово назначения. Кормовите пробиотични препарати намират широко приложение в практическото животновъдство, позволяват да се използват съществуващи системи за разделяне и кормиране на селскохозяйствени животни, да се разполагат с компоненти на съвременните рационални кормилации на животните [21].
Целите на настоящата обзорна литература са налице в разгледани данни, отчитащи биологичната ефективност на новите поколения кормови пробиотици, механизми на техните действия, а също така и възможни приложения, използвани резултатите от тези изследвания в практически животноводства. Обсуждаются литературни справки и собствени резултати, лесно представят подходи към увеличаване на рентабельности животноводско производство.
Современная концепция пробиотиков
Пробиотиците - живи микробни добавки, които показват благоприятно действие на организма на човека и животното путем подобряване на кишечното микробно балансиране [46], стимулират обменните и имунните процеси [28]. Това е обект на всесторонни научни изследвания и важен продукт на мировите ринки, обемът на продажбите се оценява в милиарди долари в година. Широкомуникационните потребители имат достъпни продукти за производство на пробиотични продукти и питиета, които произвеждат кормове за селскохозяйствени и домашни животни, птици и риби, които използват пробиотични препарати в състава на кормовете. Применение пробиотиков се свързва с решение на различни проблеми със здравето, повишаване на ефективността пищереване, стимулация на роста и развитие. Пробиотични перспективи в качествени профилактични средства и сопутствующей терапии, но не използвани основни средства за леченията на болестта. На специалното коллоквиуме Американската Академия Микробиологии в ноябре 2005 г. обсуждали въпроси, взаимодействащи между микроорганизмите, имунитетите и болестите, доказателни данни в отношенията на лечебни собствени пробиотиков и възможни перспективни тяхното използване [56]. Установено, че прилагането на пробиотици може да посочи противоинфекциозно, имунномодуляторно въздействие върху организма, повишаване на бариерни функции (физиологически механизми, предпазващи организма от въздействието на заобикалящата среда, предразполагащи проникване в него бактерии, вируси и вредни вещи), успокояващи двигатели и техники са сериозни.
Введени с препарати пробиотични штамми взаимодействат с съобщения бактериални кишечници, излъчват метаболити, влияят на активността на имунната, гормоналната, пищеварителната система организма-хозяина.
В последното десетилетие концепция пробиотиков претерпел съществени изменения. Възрастово внимание изследователите на исторически компоненти и продукти метаболизъм пробиотични микроорганизми. По-нататъшни изменения са представени с биологични ефективни пробиотици и обръщане на това време, които създават елементи от клетовете и техните метаболити в редица случаи, които показват, че не са малко ефективни [37]. Выделяют 4 поколения пробиотиков [38] (табл. 1).
Таблица 1
Современные поколения пробиотиков
Монокомпонентни препарати, съдържащи един штамм бактерии
Самоелиминирующие се антагонисти, които имат отношение към рода Bacillus, главният модел, V.subtilis, B.licheniformis
Комбинирани препарати, състоящи се от многократни штаммови бактерии (поликомпонентни) или включващи добавки, усилващи техните действия
Имобилизирани на сорбенте (сорбированные) живые бактерии
В настоящото време на ринке пробиотици востребовани комбинирани препарати. Намиращи се в сложни пробиотични штамми бактерии, които се обединяват по способности, штаммовите продукти продуцират различни ферменти, биологически активни хора са такива, които те доползват друг друг по биологична активност. Освен това, за получения на нови поликомпонентни биологически активни препарати комбинират комплексни пробиотици с пребиотични вещества.
К прогрессивният формат подготвя новороденото поколение се отличава с сортирани форми пробиотиков. Сорбирани пробиотични вещества, съдържащи бактерии, обезвредени на частици твърдо сортови сортове. За начало химически и електростатически силни взаимодействия такива форми със стенкой кишечника по-горе. Сорбентът използва дезинтоксикацию и репаративния процес. Най-често се използват естествени сортове - угли, цеолити и кремнеземы. Те обладаят относително добри сортови и ионообменни способности, имат силно развит надежден каркас, с порами различни диаметри, способни взаимодействат с различни вещества и клетка пробиотика. Биологична активност на такива препарати се свързва с тем, че микробна маса живи пробиотични бактерии се обездвижва на сорти, благодарение на чему те най-добре се изживяват и бистрее засяват кишечник [15, 36]. Иммобилизираната форма на пробиотичното лекарство може наистина да повиши защитата на бифидо- и лактобактериите при прохожденията през желудок, където обикновено има препарати, съдържащи лиофилно изсушени клетки, пробиотици, които терят повече от 90% активности. Композициите цеолити + пробиотични облаци създават изразени имунокоррегиращи свойства [12], нормализират микробиоценоз желудочно-кишечно тракта, повишават неспецифична резистентност организъм, стимулират функционалната функция пищеварителна система, обладават, като това могат да бъдат дефинирани Биологична ефективност сорбирани пробиотични възможности, които могат да се използват в малки количества дози бактерии. В частности, с една доза Бифидумбактерин форте (пробиотик, сорбиран на косточковом активиран угъл) се съдържа не малко 107 КОЕ / г бифидобактерия (брой колониращи клеточни бактерии (КОЕ) - посочва се в инструкции по приложение), което може да се сравнява със съдържанието на бактериите в кислородните продукти на два порядъка по-малко дози, препоръчана за обичайни пробиотиков. Адсорбирани върху неутрално фито-носетни клетки, пробиотични микроорганизми, съдържащи се в препарати кормово назначение Целлобактерин и Целобактерин-Т [13, 29], дозата вложена в корма има 1 кг на тонус комбикорма. Учитавая, която е в 1 т комбикорма с Целобактерином Съдържа 104 КОЕ пробиотика [22], това е 107 КОЕ на 1 кг препарат.
В качествените сортове ефективност се използват пребиотиков. Пребиотики - това е клас клас препарати за регулиране на кишечной микрофлори, който приобретае все по-голяма популярност. Пребиотики - субстрати, стимулират естествената микрофлорусия, не се превариват и не всасыват в желудка и тонком отделят кишеника. Попадайте в толстый отделен кишечник, пребиотиците използват в качествата питателна среда за нормална микробиотика [41, 43, 51]. В млекопитающих в перви дни след рождения основен пребиотически субстрат е лактулоза, намираща се в солидна молока. С перодом на смесено кормление субстрат, способен да расте нормална микробиота, да се разполагат кристални елементи от растителни тъкани, различни полисахариди (пектини, инулин и др.). За разни видови животни е предложен пробиотичен препарат Зоонорм, който се намира от лиофилизирана микробна маса живи бактерии Bifidibacterium bifidum във вид на микроколони, сортирани на частици, активирани и използвани в лактулози [31].
Научно обоснование конструиране на пробиотични препарати основано на анализи взаимоотношенията макро- и микроорганизма. Понастоящем активно развива представяне на кишечна микробиотека като самостоятелно «органи», която се вижда от биопленки, покриваща стенку кишечника [5, 19, 26, 27, 42, 44]. Разполагайте в хода на развитието на организма биопленка - прочна система, предразполагаща внедряване на чужеродните штаммов. Колективният имунитет биопленки кишеника не е способен в пълна мярка осъществява коррекция дисбактериозов с помощни препарати живи културни пробиотиков - бифидобактерия, лактобактерия, ентеробактерия, по този начин промишлени штаммы микроорганизми в последствие биологични несъвместими, които не са използвани, но се използват в източници, в които са интегрирани. Тем не малко, пробиотичните препарати се прилагат следва. В съдържанието на кишечника присъстват различни симбионти и паразити - транзиторни бактерии, простейши, гелминти, попаднали в нормално функциониране на животното организъм, нельзя недооценивать. Вградени с препарати пробиотични штаммы, извеждащи биологично активни метаболити, сигнални вещества, антибиотици, бактериоцини, влизащи във взаимодействие с кишечной микрофлорой и посочващи въздействие върху поддържането на всички физиологически системи от система-хозяина.
Пробиотични препарати кормово назначения
Современната интензивна индустрия животноводство, птицевъдство и рибоводство основана на използваните в качествата задължителни компоненти комбикорми различни биологически активни стимулатори обмена на веществата, пищеваренията, имунитета на животните. За повишаване на перевариваемостта и усвояемостта на кормовете, стимулацията на роста и развитието на животните, повишаването на неспецифичното електронно имунитет се прилагат ферментни, пробиотични, пребиотични и комбинирани ферментно-пробиотични препарати, а също така и комплексни пробиотични препарати, обогащенные фитокомпонентами 40, 47, 52, 53, 57]. Пробиотиците благоприятно влияят на организма хозяйна, способни да възбуждат пистоваренията, биологичното статуса, иммунното ответа, повишават ефективността на вакцинациите. Применение пробиотиков наистина вменява облекчения за лечение на болестни заболявания в животните, повишава продуктивността последни и подобрява качеството на продуктите.
Аспекты использования пробиотиков затрагивают широкий круг проблем, связанных с коррекцией кишечного биоценоза, иммунной, гормональной и ферментной систем молодняка и взрослых животных. Кроме того, использование пробиотиков имеет актуальное значение не только для животноводства, но и для здравоохранения в целях: снижения риска заболеваемости людей и повышения экологической безопасности сельскохозяйственной продукции.
Несмотря на тот факт, что полезные свойства нормальной кишечной микробиоты известны уже более 100 лет, учение о пробиотиках только развивается, и история его становления охватывает не более чем 25-летний период, когда стало известно, что нормальная кишечная микрофлора участвует в поддержании колонизационной резистентности слизистой кишечника и играет немаловажную роль в предупреждении заболеваний человека и животных. Неинфекционные желудочно-кишечные заболевания молодняка животных и птицы распространены повсеместно, развиваются с первых часов жизни животного, сопровождаются тяжелыми токсическими явлениями, характеризуются высокой смертностью, нанося значительный экономический ущерб. Проблема профилактики и лечения желудочно-кишечной патологий у животных и птицы, возбудителями которых являются условно-патогенные кишечные микроорганизмы, имеет не только экономическое, но и социальное значение. Экономические убытки от сальмонелеза в США оцениваются в 2 млрд долларов, в Канаде 300 млн долларов. В странах СНГ за последние 15 лет заболеваемость людей и птицы сальмонелезом возросла в 7 раз, при этом этиологическое значение S.enteridis в заболевании людей возросло на 30 %, у животных и птицы на 75 %, а индикация возбудителя в продуктах питания увеличилась на 50 % [14]. Предотвратить развитие многих патологий у животных позволяет использование кормов, обогащенных биологически активными кормовыми пробиотическими добавками.
Развитие интенсивных форм животноводства, птицеводства, рыбоводства и последовательное повышение их эффективности требуют решения как технических проблем, так и вопросов кормления и использования полноценных и экономически выгодных кормов для всех видов разводимых животных. Важнейшей задачей является создание и применение в практике таких кормовых смесей, которые бы максимально усваивались организмом для обеспечения его жизненных функций и обладали профилактическими свойствами [3]. Пробиотики считаются эффективным элементом технологии производства безопасной продукции животноводства и птицеводства [16].
Пробиотики кормового назначения рассматриваются ведущими специалистами как «. часть рационального потенциала животных, поддержания их здоровья и получения продукции высокого качества, безопасной как в бактериальном, так и в химическом отношении» [21].
Получение пробиотических препаратов в виде биопленки — новое направление биотехнологии
В настоящее время существует широкий спектр пробиотических препаратов, предназначенных для коррекции кишечного биоценоза, повышения неспецифического иммунитета молодняка, стимуляции откорма, молочной продуктивности, яйценоскости. В Российской Федерации на 2006 год зарегистрировано около 80 наименований отечественных и импортных пробиотических препаратов [21]. Предлагаемые на рынке пробиотические препараты различаются не только по стоимости, но и по составу, качеству, способам и дозам применения.
Определяющим фактором эффективности пробиотиков во многом являются технологии получения этих препаратов. Современный подход к разработке пробиотических препаратов подразумевает, во-первых, применение различных видов микроорганизмов в определенных сочетаниях, во-вторых, выпуск их в форме, допускающей длительное хранение при обычной температуре, и в-третьих, не теряющих своих свойств при внесении их в процессе производства комбикормов и кормовых добавок. Клинико-экспериментальные исследования показали, что под действием желудочного сока и желчи пробиотики теряют почти 90 % своей активности к моменту попадания в кишечник. Разрабатываются различные способы повышения выживаемости бактерий, например, за счет их иммобилизации на пористых микроносителях, включения в состав препарата компонентов питательной среды. Однако даже в случае научного обоснования пробиотических препаратов, далеко не все из них оказываются эффективными на практике [35].
Поиск микроорганизмов, которые можно использовать в качестве пробиотиков, представляет собой основу для разработки пробиотических препаратов. Препараты с использованием лактобацилл и бифидобактерий хорошо известны положительным влиянием в поддержании микробного баланса кишечника [49, 50]. В последние годы установлено, что не менее важны в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта животных и некоторые транзиторные бактерии, например, рода Bacillus, которые применяются во многих кормовых пробиотических препаратах, реально оказывая положительное влияние на здоровье и продуктивность животного [1, 2, 7, 23]. Оценивая перспективы использования бактерий рода Bacillus для создания биопрепаратов, можно отметить следующие их преимущества перед другими представителями экзогенной микрофлоры: безвредность подавляющего большинства представителей рода для макроорганизма даже в высоких концентрациях; способность повышать неспецифическую резистентность организма хозяина; антагонистическую активность к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов; высокую ферментативную активность; устойчивость к литическим ферментам и обусловленную этим высокую жизнеспособность на протяжении всего желудочно-кишечного тракта; технологичность в производстве; стабильность при хранении; экологическую безопасность. При обсуждении вопросов биологической активности бацилл можно отметить их способность выделять в культуральную жидкость сигнальные молекулы, иммуноактивные протеины [55] и биологически активные пептиды, в число которых входят не только пептидные антибиотики, но и гормоноподобные вещества. В экстрактах клеток и культуральной жидкости Bacillus subtilis показано присутствие соматостатин-подобных пептидов [34]. Ранее было обнаружено, что некоторые синтетические аналоги гормона соматостатина выступают опосредованными антагонистами по отношению к этому гормону, поскольку вызывают аутоиммунную нейтрализацию эндогенного соматостатина, в результате чего снижается его ингибирующее действие на гормон роста, инсулин и гастрин, и появляется ростостимулирующий эффект [45, 53]. Исследования показали, что пробиотические добавки на основе спорообразующих бактерий существенно улучшают переваримость корма у свиней. Результаты опытов подтверждают, что поросята, имеющие микробиоту, сбалансированную в результате применения термически стабильных пробиотиков, имеют лучшую конверсию корма и более высокие приросты живой массы [7].
Особенности физиологии и рационов сельскохозяйственных животных учтены в рецептуре биологически активного пробиотического препарата Ферм-КМ. Технология получения препарата включает неполное сбраживание свекловичного жома пробиотической ассоциацией; конечный продукт состоит из биомассы пробиотиков, продуктов их метаболизма, продуктов биотрансформации фитосубстрата и фитокомпонентов. В состав бактериальной композиции препарата Ферм-КМ включены живые клетки трех штаммов Bacillus subtillis, Bacillus licheniformis, а также комплекс молочнокислых бактерий. Оптимальной является композиция депонированных в ВКПМ штаммов: Bacillus subtillis В-8130, Bacillus subtillis 188, Bacillus subtillis 44-р, Bacillus licheniformis МС-12, демонстрирующих пробиотический эффект в сочетании с эндоглюканазной, протеолитической, и амилазной активностями. В препарате содержится набор важнейших ферментов: целлюлаза, эндоглюканаза, амилаза, комплекс протеаз, липаза, органические кислоты, биологически активные вещества, витамины и аминокислоты, иммуноактивные пептиды — продукты метаболизма пробиотиков. В препарат входят фиточастицы, являющиеся клетчатковым микросорбентом, пребиотики — пектины свеклы [33]. Ферм-КМ — это уникальный препарат, содержащий не только комплекс специально подобранных микроорганизмов, но также биотрансформированный фитосорбент и продукты твердофазного сбраживания растительного субстрата (в том числе, иммуноактивные пептиды [34], стимулирующие неспецифический иммунитет и процессы пищеварения). Пробиотические бактерии отличаются повышенной жизнеспособностью и устойчивостью к неблагоприятным условиям окружающей среды, поскольку находятся в виде биопленки на фитоносителе (рисунок).
Сброженный свекловичный жом с биопленкой бактерий B. subtilis В-8130. Вегетативные клетки бациллы на фитоносителе отмечены стрелками. Сканирующая электронная микроскопия, 10000×
Как уже отмечено выше, биологическая эффективность пробиотических препаратов определяется не только свойствами используемых штаммов микроорганизмов, но также технологией их получения. Новое перспективное направление, используемое в технологии производства препарата Ферм-КМ — получение биологически активной кормовой добавки, содержащей биопленку пробиотических бактерий на поверхности фитосубстрата, что позволяет микроорганизмам сохранять жизнеспособность при высушивании, при гранулировании комбикормов и выживать при комбинировании с некоторыми кормовыми антибиотиками. Исследования показали, что в биопленке по-иному, в сравнении с чистыми культурами бактерий, происходят их физиологические процессы, в том числе продукция метаболитов и биологически активных веществ [4, 19]. Особое значение имеют сигнальные вещества, обеспечивающие взаимодействие клеток в биопленке. По-видимому, такие вещества могут служить аналогами регуляторных молекул животного организма. Можно предположить, что соматостатин-подобный пептид, обнаруженный при развитии некоторых штаммов Bacillus subtilis, является фактором межклеточной коммуникации. Известно, что грамположительные бактерии осуществляют коммуникации, используя олигопептидные сигнальные молекулы [6]. Согласно симбиогенетической теории происхождения эукариот многие сигнальные молекулы, общие для бактерий и эукариот, у первых выполняли синэкологические функции (обеспечение взаимодействия клетки с другими членами прокариотного сообщества), а у вторых стали обеспечивать согласованную работу клеток многоклеточного организма [17]. Поэтому препараты, основанные на твердофазных процессах и получении биопленки пробиотиков, отличаются от препаратов-аналогов наличием сигнальных веществ бактериального происхождения, влияющих на гомеостаз многоклеточных организмов-хозяев. Получение пробиотических препаратов в виде биопленки — новое направление биотехнологии.
Препарат разработан специалистами ООО «НТЦ БИО» совместно с Институтом проблем экологии и эволюции им. А.Н. Северцова РАН [32]. ДБА Ферм-КМ позволяет на 50-70 % уменьшить применение распространенных импортных ферментных препаратов и антибиотиков, применяемых для лечения заболеваний ЖКТ. Ферм КМ отличается невысокой стоимостью и полностью ориентирован на зерновую специфику российских комбикормов. Препарат обеспечивает высокоэффективное использование имеющихся кормов, увеличивает конверсию корма, прирост живой массы, значительно улучшает переваривание животными, птицей и рыбами некрахмалистых полисахаридов из различных видов зерна, повышает резистентность организма к неблагоприятным факторам [20, 24]. Испытания препарата в ПФ «Приосколье» показали, что применение Ферм-КМ повышает сохранность цыплят-бройлеров на 0, 7 %, увеличивает суточный привес живой массы тела на 2, 6 %, увеличивает конверсию корма на 3 %. Влияние Ферм-КМ на яйценоскость продемонстрировано в птицекомплексе ЗАО «Реал-Инвест»; при этом отмечено, что одним из главных критериев улучшения производственных показателей было не только увеличение общего количества товарного яйца (табл. 2), но и его качество. Количество некондиционного яйца сократилось с 3500 до 430 штук в день. Куры-несушки стали вести себя более спокойно и почти не реагировали на присутствие людей (более 3-х человек). Патологоанатомическое вскрытие показало, что уже после 14 дней приема препарата с кормом полностью отсутствовали признаки катарального и геморрагического воспаления тонкого отдела кишечника, в 3 раза сократилось выпадение яйцеводов кур, сами яйцеводы были чистого белого цвета, что свидетельствует о положительном действии препарата Ферм-КМ на продуктивность птицы. Опыт проведен на 73000 несушек кросса Хайсекс коричневый в возрасте на старте — 329 дней (т.е. вторая фаза продуктивности).
Проведенная в условиях физиологического двора ГНУ ВИЖа и ООО «Вёрдазернопродукт» Рязанской области на доращиваемых поросятах-аналогах серия лабораторных и научно-хозяйственных опытов выявила перспективность применения Ферм-КМ в практике кормления свиней. Для определения приростов живой массы (абсолютного, среднесуточного) проводили ежедекадное индивидуальное взвешивание животных. Полученные в опыте материалы были обработаны биометрически с использованием t-критерия Стьюдента. Некоторые результаты представлены в табл. 3. Выявлено, что на фоне достоверного увеличения интенсивности роста поросят, выращиваемых с 36- до 75-дневного возраста, при включении в состав комбикорма ферментно-пробиотического препарата Ферм-КМ, были снижены затраты кормов и энергии на единицу прироста (на 4, 9 % по сравнению с контролем). Включение в комбикорма Ферм-КМ обеспечило благоприятные кормовые условия для получения более высоких показателей продуктивности поросят за счет улучшения конверсии питательных веществ корма в прирост живой массы.
Таблица 2
Производственные показатели в опыте с Ферм-КМ в рационе кур-несушек
www.fundamental-research.ru
